植物基因组DNA快速提取试剂盒

产品货号：

GS0063

中文名称：

植物基因组DNA快速提取试剂盒

英文名称：

Rapid Plant gDNA Isolation Kit

产品规格：

50次|100次

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本试剂盒可以从100mg新鲜植物样品中可以获得5～15μg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7~1.9。抽提出的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。

组分	50次	100次
Buffer PCL	24mL	48mL
Buffer PP	12mL	24mL
TE Buffer (pH8.0)	10mL	20mL

保存：室温，4℃可保存更长时间。

注意事项

Buffer PCL中含有刺激性化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。

准备工作

自备材料：小型高速离心机（最大离心力≥12000×g）、1.5mL离心管、75%乙醇、异丙醇、RNase A (20mg/mL)、β-巯基乙醇等。
每次使用前请检查Buffer PCL是否出现沉淀，如有沉淀，请于65℃溶解后使用。

取50～100mg新鲜植物组织用液氮研磨成粉末，转移至1.5mL离心管中。
- 研磨是否充分，将会影响基因组DNA的得率。磨碎标准是在加入Buffer PCL后，在溶液中没有大的组织团块。
- 样品尽量不要采用植物的微管组织。
- 对于含水量较多的样品，请尽量在研磨和裂解前挤干去除水分。
加入400μL Buffer PCL，8μL β-巯基乙醇，震荡混匀。65℃水浴45min至样品完全裂解。
- 水浴过程中，每10min颠倒混匀一次，可促进样品裂解。
- 如需得到无RNA的DNA，可在水浴后加入20μL的RNase A（10mg/mL），室温放置2～5min。
加入200μL Buffer PP，充分颠倒混匀，-20℃冰箱放置5min。
室温10000rpm离心5min，将上清转移到新的1.5mL离心管中。
（可选步骤）加入500μL氯仿（自备），颠倒混匀，室温12000rpm离心5min，取上清。
- 此步骤可进一步去除蛋白等杂质，可以获得纯度更高的DNA。
加入等体积的异丙醇，颠倒5～8次使之充分混匀，室温放置2～3min。室温10000rpm离心5min，弃上清。
- 加入异丙醇后可看见白色絮状沉淀，如果沉淀较少，可使用预冷的异丙醇或加入异丙醇后，于-20℃冰箱放置20min再离心。
加入1mL 75%乙醇，颠倒漂洗1～3min，10000rpm离心2min，弃上清。再重复此步骤一次。
- 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
开盖室温倒置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
得到的DNA用50～100μL TE Buffer溶解。提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。
- TE Buffer为10mM Tris-HCl，1mM EDTA,pH8.0。

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